دانلود مقاله هیبرید سازی سلول های سوماتیک
فرمت فایل دانلودی: .docxفرمت فایل اصلی: docx
تعداد صفحات: 15
حجم فایل: 81 کیلوبایت
دانلود تحقیق درس بیوتکنولوژی در دامپروری
هیبرید سازی سلولهای سوماتیک
تعداد صفحات : 15فرمت ورد و قابل ویرایش Word
مقدمه
یاخته پیکری به انگلیسی Somatic cell به یاختههایی گفته میشود که در پیدایش بافتها و اندامهای بدن نقشآفرینی میکنند. در برابر یاختههای پیکری، یاختههای جنسی هستند که به پیدایش گامتها شامل اسپرم و تخمک میانجامند.
یاختههای پیکری به همه یاختههای جانداران چندیاختهای به جز یاختههای جنسی و یاختههای زایشی و یاختههای بنیادی دگرگوننشده گفته میشود. یاختههای پیکری هم اجزای اندامگانهای پریاختهای را تشکیل میدهند. بافتهایی در بدن مانند بافتهای ماهیچه، کبد، استخوان، عصب، پوست و دیگر بافتهای غیرجنسی همگی از یاختههای پیکری هستند.
برخلاف یاختههای جنسی مثل اسپرم یا تخمک که تکدسته هستند و یک دسته کروموزوم دارند یاختههای پیکری دودسته هستند و دو دسته کروموزوم دارند (یعنی یک دسته کروموزوم از پدر و یک دسته از مادر)
تکنیک هیبریدسازی
تکنیک هیبریدسازی به عملی اطلاق می شود که در آن یک قطعه DNA یا RNA نشان دار تک رشته ای بعنوان Probe با قسمتی از DNA تک رشته ای شده سلول بعنوان Targetاز طریق تشکیل جفت باز (base pairing) اتصال پیدا می کند. واضح است که Probe از نظر توالی باید مکمل توالی Targetباشد.
عمل هیبریدسازی می تواند در محیط مایع و یا در محیط جامد انجام گیرد و نشان موجود در probeها می تواند آنزیم های تولیدکننده رنگ (Chromogenic) و یا ترکیبات فلورسانت (Fluorescent) باشند. اگر عمل هیبریدسازی در داخل سلولهای نمونه یعنی در محل واقعی Target انجام شود، هیبریدسازی در محل اصلی یا In situ Hybridization یا ISH نامیده میشود. پس تکنیک های CISH و FISH اختلافشان در سیگنال هائی است که تولید می کنند. در CISH سیگنال نهائی تولید رنگ است که در زیر میکروسکوپ (Bright- field) مشاهده می شود ولی در FISH سیگنال نهائی تولید فلورسانس است که با میکروسکوپ فلورسانس و بکمک فیلترهای مخصوص و دوربین عکسبرداری قابل بررسی است با یک مقایسه، خیلی زود معلوم می شود که تکنیک FISH نسبت به CISH احتیاج به ابزار بیشتری دارد و هزینه انجام آن نیز بیشتر است.
هیبرید سلول سوماتیک انسانی-جوندگان ثابت کرده اند که یک ابزار مفید برای نقشه برداری بیان ژن به ویژه توالی DNA٬ با استفاده از ارقام سلولهای بدنی است. دقت و صحت این روش وابسته به شناسایی تفاوت بین گونه انسان و جوندگان است. اولین هیبرید سلول های سوماتیک تولید شده از همجوشی خود به خود بین سلول های دچار کمبود در تیمیدین کیناز موش (TK) و فیبروبلاست جنینی انسان وجود داشتند بودند. هیبرید در هایپوکزانتین آمینوپترین تیمیدین (HAT) انتخاب شدند. سلول های موش کشته و هیبرید سلول انسان این است که به عنوان هیبریدی رشد کرد، کروموزوم موش تمام نگهداشته شدند، اما کروموزومهای انسان ترجیحا ازبین رفته بودند. این مشاهدات کلیدی استفاده از آنها در نقشه برداری ژن و تخصیص تخصیص ژن های انسان و تعیین توالی آنها را قادر می سازد. از آنجا که خط سلول موش TK-کمبود بود، انتخاب هیبریدی موش- انسان منجر به حفظ ژن انسان برای TK مورد نیاز بود. پس از چند نسل، اکثریت از سلول های هیبرید فقط یک کروموزوم مشترک را حفظ کرده بود، کروموزوم 17. بنابراین، ژن TK انسان می تواند به کروموزوم 17 اختصاص داده شود.